糖和其他物质的灵敏测定碳水化合物是非常感兴趣的因为它在生态学、生物学、临床和营养学研究中的重要性。
有许多不同的测定方法在使用,但这些往往需要非常多的时间昂贵的设备例如高效液相色谱-质谱法或者有点执行起来很复杂例如衍生化气相色谱法.
这不是分居的错。
在高效阴离子交换色谱(HPAEC)高效液相色谱(HPLC)系统上分离效果良好。
pK中的小差异A.碳水化合物的羟基值导致糖在强碱性洗脱液的阴离子交换树脂上的保留不同。
紫外或荧光检测在液相色谱法中都很常见,但由于分子中缺少生色团,因此实际上不能用于糖的检测。折光率检测法操作简单,但灵敏度不高,不能用于低糖含量的测定。
通过衍生步骤形成一个发色团,光谱法可以对碳水化合物更敏感。然而,衍生化需要额外的设备、化学品和工作步骤。
另一种方法是利用碳水化合物能发生电化学反应这一事实。这使得它们能够通过电流测量法进行非常有选择性的灵敏检测。
应用实例:研究替代燃料和原材料用木糖和糖醛酸的分析。
在定量分析中,安培法被称为高灵敏度测定方法.
在恒定的电化学电位下,在工作电极上测量电解电流。
这个电解电流是成比例的到氧化/还原分析物的浓度.
经典安培法作品不连续地:填充反应器、测量/滴定、清空反应器、清洁、再生、下一次测量。。。因此不能直接与此形式的HPLC一起使用.
克努尔的糖分析色谱系统脉冲电流检测(PAD)包括糖检测所需的电极再生。使用一个非常小的测量单元,这种技术可以实现快速测量。
恶性循环电极的测量、解吸和再生只需半秒钟在分析过程中不断重复. 因此,与其他流量检测器一样,可以在HPLC中记录色谱图。
除了刚准备好的碱性水洗提液,程序要求无其他化学品.
电化学检测不仅仅是非常合适碳水化合物测定用.
其他可氧化或可还原的分析物,比如脂溶性维生素,也可以确定在高效液相色谱系统中使用效果很好。