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高效液相色谱(HPLC)原理和组分

高效液相色谱(HPLC)是一种良好的基于​​特定化学和分子特性将物质混合物分离成其组成部分的技术。液体的分离是基于流动相(洗脱液)和固定相之间感兴趣的分析物的分布。

该固定相含有HPLC柱内,并将含有分析物的样品注入到柱上,然后用流动相的流动泵送。当它们通过柱子时,组分与固定阶段不同地相互作用,导致它们在不同时间从柱分离和洗脱。通常用HPLC检测器检测分离的物质。

一个基本的分析化学ICAL高性能液相色谱系统包括若干组件,包括洗脱液库、泵、进样阀、高效液相色谱柱、检测器和安装有液相色谱数据系统的PC。在这篇博客文章中,Knauer更详细地探讨了这些基本的液相色谱模块的工作原理。

高性能液相色谱泵和洗脱液储层

有两个主要模式用于通过HPLC系统泵送移动相。当移动相在运行期间移动相位保持恒定时使用等级洗脱,例如当洗脱液正在回收时。当洗脱液组合物在分离过程中会发生变化时,使用梯度洗脱系统。

洗脱物质的检测信号称为峰值。施加梯度使得色谱图中的晚期峰值通过根据适当改变流动相组合物来洗脱比以等物体模式更快。

在梯度洗脱系统中,可以使用高压和低压梯度(HPG / LPG)。LPG使溶剂能够从不同的储存器中抽取并在泵的吸入侧混合,而HPG使用多个泵来提供用于在排出侧混合的单独溶剂流。

高效液相色谱柱

HPLC柱是该仪器的基础。它含有将样品成分分离成其组成部分所需的固定相培养基。几何是谈到HPLC列的重要指标。内径和长度冲击保留率和洗脱时间,颗粒尺寸和静止相的化学成分。HPLC柱支持多种分离机制,包括正常和反相,尺寸排除,离子交换,亲水性相互作用,亲和力等。

稳定的柱温是实现可重复分离结果和一致的保留率的另一个关键因素。柱式恒温器的使用是为了保持稳定的温度,并确保加热套和洗脱加热器之间的温度分布均匀。

高性能液相色谱探测器和软件

用于获取峰的检测器的类型由分析物确定。可以使用各种HPLC检测原理,这里描述一些:UV探测器是常见的,但需要物质分子在光谱的紫外线部分中吸收光。当物质不吸收紫外线时,使用RI检测器。这些探测器用于测量分离的分析物的信号峰随时间,但只能用于等级应用。bob电竞下载完整的一组峰被称为色谱图。这由色谱数据系统产生,因为检测器将RI或UV信号转换为电值。每个不同的峰值提供有关分析物的定性和定量信息,并且数据管理系统随后可以计算样品的组成。

高性能液相色谱用Knauer

克诺尔在开发和制造先进的科学工具和液相色谱仪器方面有超过50年的经验。我们理解高效液相色谱/ UHPLC并且可以建议分析专有分析物的合适方法和技术。

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